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從這四個方面來認(rèn)識超微量分光光度計

更新時間:2019-03-21點(diǎn)擊次數(shù):2554
  從這四個方面來認(rèn)識超微量分光光度計
  超微量分光光度計設(shè)計原理和工作原理,允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化,即儀器有一定的準(zhǔn)確度和度。另外,還需考慮核酸本身物化性質(zhì)和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測試時,離子濃度太高,也會導(dǎo)致讀數(shù)漂移,因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液,如TE,可大大穩(wěn)定讀數(shù)。樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素:由于樣品中不可避免存在一些細(xì)小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測試效果。為了較大程度減少顆粒對測試結(jié)果的影響,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值較好在0.1-1.。在此范圍內(nèi),顆粒的干擾相對較小,結(jié)果穩(wěn)定。
  超微量分光光度計是一類很重要的分析儀器 ,無論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域 ,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門 ,紫外可見分光光度計都有廣泛而重要的應(yīng)用。分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。超微量分光光度計已成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。
  超微量分光光度計可以對dsDNA、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度進(jìn)行快速測量,并可以計算這些核酸在260nm、280nm處的吸光值,也可以檢測菌液OD600值及監(jiān)測懸浮細(xì)胞生長情況,具體優(yōu)勢主要有以下四個方面:
  1.紫外檢測:超微量分光光度計可以在常規(guī)紫外光波長下檢測樣品吸光值,不僅靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、有較好的選擇性,而且對環(huán)境溫度、流動相組成變化和流速波動不太敏感。
  2.核酸檢測:可檢測dsDNA、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度及其在260nm、280nm處的吸光值;
  3.蛋白檢測:檢測普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值,BCA、Bradford、Lowry、Pierce 660nm 蛋白定量分析;
  4.超微量分光光度計還能用于其他項目的檢測,比如:菌液/懸浮細(xì)胞濃度檢測,動力學(xué)檢測,全波長掃描,探針檢測,用戶自定義檢測等。
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